做ELISA試驗為何失敗不成功的關鍵要點解析
日期:2021-10-08 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:957 次
在ELISA試驗測定方法中有不少因素影響,其實際操作流程還是要遵循相應的技術規范和要求。除正常反應之外,中海在檢查核驗中還常常見到出現假陽性或假陰性結果問題。以下是中海生物技術總結解析做ELISA實驗失敗zhzbio.comELISA試驗不成功的四個關鍵要點:
ELISA實驗失敗關鍵要點?標本自身的影響:
溶血標本和混有紅細胞的血清經ELISA法試驗檢測易產生假陽性??赡苁羌t細胞中的血紅素或溶血血清中包含過氧化物酶的紅蛋清,在清洗過程中通常不容易完全洗干凈。它能使過氧化氫釋放原始氧,從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性有色物質,即變成藍色,產生假陽性。造成嚴重溶血標本禁用。
ELISA試驗不成功關鍵要點?標本被細菌病毒感染:
因為細菌病毒或許包含內源性辣根過氧化物酶,被真菌感染的樣品與溶血樣品一致,或許產生非特異性顯色,勢必會影響ELISA實驗測定方法最終結果。
ELISA實驗失敗關鍵要點?標本儲藏保管不合理:
標本在冰箱中放置時長太久,會造成間接ELISA測定本底過深,產生假陽性。為了更好地克服上述影響,ELISA試劑盒測定方法的血清樣品應新鮮采集。如無法馬上測定方法,可將五日內測定方法的血清樣品儲存在四攝氏度,七天過后測定方法的血清樣品應較低溫度冷藏。冷凍儲藏和解除凍結的標本,造成雞蛋白質部分集中化,不均勻分布,應充分融合后進行測量。此時應當輕輕地融合,無需明顯振蕩。
ELISA試驗不成功關鍵要點?標本凝結并不充分:
日常工作,偶而為了更好地贏得快速檢測的時長,通常在血液進行凝結前,利用強制離心分離血清,使一部分纖維蛋白原殘留在血清中,中海ELISA測定方法時可產生看得見的纖維蛋白塊,易于產生假陽性最終結果。于是采集后應當使血樣充分凝結,接著進行血清分離。
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