酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定實驗組織樣本制備處置辦法
日期:2022-01-19 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1096 次
以便切實保障ELISA實驗報告的準確性,在收集整理樣本前務必有完善的計劃方案。中海生物覺得新鮮樣本應及早檢查測驗,收集整理后七天內(nèi)檢查測驗的樣本應在四度環(huán)境儲藏預留。如果有較為特殊緣由應該定期進行收集整理樣本,告知樣本按時封裝,并在零下二十度至零下八十度儲藏。主要是因為冷藏柜與室內(nèi)溫度存有相應的溫度差,蛋白質(zhì)更易生物降解,同時影響到科學試驗品質(zhì),于是應防止重復融凍。請結(jié)合自身的實際情況正確處理各種不同的酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定實驗中血清/血漿/尿液/細胞培養(yǎng)上清/組織樣本制備處置辦法。
㈠血清:室內(nèi)溫度下的血液自然而然凝結(jié)十至二十每分鐘,以每分鐘兩三千轉(zhuǎn)離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液,假如儲藏環(huán)節(jié)中發(fā)生沉淀物,需重新離心。
㈡血漿:抗凝劑應結(jié)合樣本標準要求選取乙二胺四乙酸或檸檬酸鈉。以每分鐘兩三千轉(zhuǎn)離心混和十至二十每分鐘后,謹慎收集整理上清液,假如在儲藏環(huán)節(jié)中生成沉淀物,重新離心操作。
㈢尿液:用沒有細菌試管收集整理,以每分鐘兩三千轉(zhuǎn)離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液,假如在儲藏環(huán)節(jié)中生成沉淀物,重新離心。
㈣細胞培養(yǎng)上清:檢查測驗分泌成份時,用沒有細菌管收集整理。中海核查測驗細胞內(nèi)成份時,細胞懸液用PH7.2~7.4的PBS緩沖液稀釋,細胞濃度值實現(xiàn)一百萬/毫升左右。重復融凍會損傷細胞,釋放出來細胞內(nèi)成份。以每分鐘兩三千轉(zhuǎn)離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液。假如在儲藏環(huán)節(jié)中生成沉淀物,應重新離心。
㈤組織樣本:切好樣本后稱重,添加足量PH7.2~7.4的PBS緩沖液,用液氮冷凍儲藏預留。樣本溶化后維持在二至八度。添加足量PH7.2~7.4的PBS緩沖液,用手或勻化器完全勻化樣本。其中一部分包裝檢測,剩余的冷藏預留。
結(jié)合有關資料,樣本收集整理后應及早提煉,提煉后應及早開展科學試驗。中海生物技術(shù)假如不能馬上開展試驗檢測,可將樣本儲藏在零下二十度,但應防止重復融凍。含疊氮化鈉的樣本不能檢查測驗,由于疊氮化鈉抑制辣根過氧化物酶的活力。
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