配制培養基時的注意事項以及常見問題分析
日期:2023-10-25 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:689 次
培養基在滅菌前,需進行加熱溶解(含瓊脂的培養基需煮沸4-6次至瓊脂完全溶解),再進行分裝滅菌(應不超過1000mL);
含瓊脂培養基,若滅菌前未進行加熱溶解,滅菌后需充分搖勻使用;
所有培養基不宜滅菌過度和長時間保溫,特別是含糖量高的培養基,如沙氏葡萄糖瓊脂,滅菌過度或保溫時間過長易使葡萄糖發生焦化,滅菌后的培養基顏色會變深,pH會下降,此外還會使蛋白胨中的維生素分解,降低培養基的營養;
需另加添加劑的培養基通常在培養基冷卻至50℃左右時加入,已加入添加劑的瓊脂類培養基不可熔化再次使用;
配制好的培養基需及時滅菌,不可久置;
培養基不可重復滅菌;
瓊脂培養基不可反復熔化使用;待用的瓊脂培養基可置47-50℃水浴保溫或50-60℃烘箱保溫,一般不可超過4小時;
使用蒸餾水或純化水配制。飲用水或自來水中由于含礦物鹽離子,配制培養基會產生渾濁現象;
容器不易過滿,容量至少應比培養基體積大20%。
(1)稱量錯誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養基pH不正確
(4)加熱過度
(5)瓊脂量不足
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