生物菌種保存辦法和活化次序操作
日期:2024-01-31 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:661 次
將貯藏好的微生物菌種放入合適的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)叫做菌種活化。想獲得有足夠接種次數(shù)的有活力的培養(yǎng),就需要漸漸擴展增大培養(yǎng)更純更好的培養(yǎng)物,中海微生物菌種的發(fā)酵通常需要兩三代復(fù)壯過程,貯藏時的條件往往與培養(yǎng)時的條件不同,因此必須進行活化操作,讓微生物菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。
要了解微生物菌種活化次序,需要微生物菌株保存的方法。目前中海生物沿用液氮超低溫凍結(jié)法和80℃冰箱凍結(jié)法/常規(guī)定期移植法/液體石蠟法/沙土管法/真空冷凍干燥法/等國內(nèi)外常用的菌種保存方法,不同的微生物菌種保存辦法zhzbio.com微生物菌種活化次序也不相同:
⑴液氮超低溫冷凍法類似于-80℃冰箱冷凍法。安瓿管或塑料冷凍管從醫(yī)用冰箱中取出,馬上置于38℃-40℃水溫活化并適當搖晃大約50秒到100秒,直到內(nèi)部的冰完全溶化后打開塑料冷凍管和安瓿管,中 海把內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到合適的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
⑵常規(guī)定期移植法的菌種活化非常容易,直接移植即可;
⑶活化保存在液體石蠟中的菌種時,選擇少量菌種并將它們轉(zhuǎn)移到合適的新鮮培養(yǎng)基中,生長繁殖后再轉(zhuǎn)接。
⑷沙土管法保存菌種活化時,應(yīng)在無菌環(huán)境下打開沙土管,取一些沙子放在合適的斜面培養(yǎng)基上,待細菌繁殖生長后再轉(zhuǎn)接,把沙子和土壤顆粒放在合適的中.海液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后轉(zhuǎn)接到斜面上。
⑸真空冷凍干燥法保存菌種活化時,先用70%酒精棉擦拭安瓿上部,加熱安瓿管頂部,將無菌棉簽浸入冷水中,擦拭一圈頂部,頂部出現(xiàn)裂紋,敲擊用刀或鑷子夾住頸部,敲掉破裂的安瓿管頂部,中'海用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌種,用無菌吸管轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中進行中溫培養(yǎng);
根據(jù)以上微生物菌種保存辦法,中??偨Y(jié)將微生物菌種從保存狀態(tài)活化四個次序操作:
①制備適合菌株生長的中海培養(yǎng)基。
②將菌株從保存狀態(tài)恢復(fù)到室溫狀態(tài),如解凍冷凍菌株。
③將保存好的菌種通過操作接種到培養(yǎng)基中,此步驟稱為菌種復(fù)壯。
④中海選擇培養(yǎng)基上復(fù)壯的菌落,篩選部分菌落接種新的培養(yǎng)基,重復(fù)此步驟兩叁次,即可長出更好的菌落。
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