禽流感(H9 亞型)血凝抑制試驗陽性血清使用說明書
日期:2023-12-05 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:736 次
【獸藥名稱】
通用名稱:禽流感(H9 亞型)血凝抑制試驗陽性血清
商品名稱:無
英文名稱:Avian Influenza Virus (H9 subtype) positive
Serum of Blood Hemagglutination Inhibition Test
漢語拼音:Qiuliugan(H9yaxing)Xueningyizhishiyan
Yangxingxueqing
【【主要成分與含量】本品系用禽流感病毒(H9 亞型)感染 SPF
雞制備,效價≥1:128(即 27)
【性狀】微黃色或淡紅色澄清液體,久置后有少量沉淀。
【作用與用途】用于禽流感(H9 亞型)病毒血凝抑制(HI)試
驗陽性對照
【用法與判定】
1 材料
移液器及吸頭、1/15mol/L PBS(pH 值 7.0-7.2)、96 孔微量血凝
板(V 型)、1%(V/V)雞紅細胞懸液、加樣槽等。
2 試驗操作
2.1 血凝試驗(HA)
96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS 0.025ml,取禽流感(H9)血
凝抑制試驗抗原 0.025ml 加入第 1 孔中,反復稀釋 5~10 次混勻,從第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔,
依此倍比稀釋至第 11 孔。每孔加入 PBS 0.025ml,再加入 1%(V/V)
雞紅細胞懸液 0.025ml。第 12 孔為紅細胞對照孔。將血凝板震蕩混勻,
室溫放置 15~40 分鐘。
2.2 配制 4 個血凝單位抗原(4HAU)
依據血凝效價,配制 4 個血凝單位抗原(4HAU)。舉例:血凝效
價為 1:128,即 128/4=32(即稀釋倍數為 1:32)。取 PBS 9.0ml,加入抗
原 1.0ml,(即成 1:10 稀釋)震蕩混勻取 1.0ml,加入 2.2ml PBS 中,
使最終濃度為 1:32。對其血凝價進行回歸檢驗后,2~8℃存放待用。
2.3 血凝抑制試驗(HI)
96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS 0.025ml,第 12 孔加入 PBS
0.05ml,取本品 0.025ml 加入第 1 孔中,反復稀釋 5~10 次混勻,從
第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀釋混勻取 0.025ml 加入第 3 孔,
依此倍比稀釋至第 10 孔。取 4HAU 于 1-11 孔每孔加入 0.025ml,血
凝板震蕩混勻,37℃作用 20 分鐘。再每孔加入 1%(V/V)雞紅細胞
懸液 0.025ml。第 11 孔為 4HAU 對照孔,第 12 孔為紅細胞對照孔。
將血凝板震蕩混勻,室溫放置 15~40 分鐘。
2.4 結果判定 將血凝板傾斜 60 度,若 4HAU 對照孔無紅細胞凝
集,紅細胞對照孔有紅細胞凝集,且呈明顯流淌的淚滴狀時,試驗成
立,可判讀結果。使紅細胞凝集被完全抑制的血清最高稀釋度,判為
血清 HI 效價。
【注意事項】1.本品避免反復凍融使用。
2.倍比稀釋時,吸液、吐液動作不應過快,防止污染其他孔及取
量不準確。
3.4HAU 應現用現配,使用時充分混勻。
4.使用 1%雞紅細胞懸液時,應輕搖混勻。
5.因環境溫度不同,判定結果時,可依據對照孔情況,適當調整
作用時間。
6.設立陰、陽性血清對照,且當陰性對照血清 HI 效價≤1:4、陽性
對照血清 HI 效價與已知結果相比,誤差≤1 個滴度時,試驗方可成立。
【規格】 2ml/瓶
【貯藏與有效期】 -15℃以下保存,有效期為 12 個月
【包裝】 10 瓶/盒
供獸醫診斷使用
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